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[아이뉴스24 정종오 기자] 국내 연구팀이 기존 CAR-T(카-티) 항암제를 보완할 수 있는 새로운 항암 기술의 실마리를 찾았다.
한국화학연구원(원장 이영국) 박지훈 박사팀은 인간 말초 혈액 유래의 대식세포(Macrophages)를 대상으로 렌티바이러스를 이용해 항암 유전자를 안정적으로 삽입시켜 CAR-M(카-엠, 카-대식세포) 생산에 성공했다.
혈액암 외에 고형암 치료에도 적용될 것으로 기대된다.
‘키메라 항원 수용체(CAR) T 세포 치료법 제2금융예금금리 ’은 환자의 면역 세포인 T세포를 신체 밖으로 추출해 특정 암세포를 공격하도록 유전자를 변형한 후 환자에게 주입하는 기술이다. 일부 백혈병 등 혈액암 치료에는 매우 효과적인데 폐암 등 고형암 치료에는 한계가 있었다.
대식세포도 면역 세포의 일종이다. T세포는 고형암 내부 침투가 어려운데 대식세포는 쉽게 침투할 수 있다. 대식세포를 T세포 채권투자 대신 항암제로 적용하려는 연구가 활발하다. 다만 기존 대식세포 활용 기술은 항암 유전자 변형이 짧은 기간만 이뤄져 치료 효과가 낮은 한계가 있었다.
연구팀은 ‘렌티바이러스’를 유전자 전달책으로 삼아 대식세포의 손상 없이 항암 유전자를 효과적으로 전달하는 다양한 기술을 개발했다.
일반적으로 어떤 유전자를 렌티바이러스에 심어 상가매매 대출 다른 세포로 전달할 때, 세포막을 얇게 만드는 양이온성 중합체 ‘폴리브렌’을 투입하고 강하게 섞는다. 렌티바이러스의 세포 침투와 유전자 전달을 높인다.
문제는 대식세포가 폴리브렌과 만나면 심각한 독성이 생기며 강한 회전 과정에서 구조가 손상되거나 생존율이 떨어진다는 점이다.
개인회생자대출상품화학연 연구팀이 CAR-M 항암제 제작 방법을 찾아냈다. [사진=화학연]
연구팀은 폴리브렌 투입이나 강한 회전 처리 대신 렌티바이러스와 대식세포의 접촉을 당초 1시간 30분에서 16시간으로 늘렸다. 그 결과 대식세포의 손상없이 렌티바이러스의 전파가 애초보다 잘 일어났다.
상권정보시스템이와 함께 대식세포의 분화상태에 따라 유전자 전달효율이 변동됨을 확인했다. 이를 고려해 말초혈액에서 얻은 단핵구가 대식세포로 분화되는 동안 7일을 기다려 암세포 추적 유전자 전달률을 높였다.
렌티바이러스가 어떤 세포로 들어갈 때 표면에서 열쇠 역할을 하는 ‘VSV-G 단백질’의 코돈을 최적화해 유전자 전달력을 더 높였다. 기존의 열쇠보다 다양한 문을 열 수 있는 마스터 열쇠를 만들고 표면에 많이 자라도록 VSV-G 생성 명령어를 바꾼 것이다.
마지막으로 렌티바이러스에 담겨 전달된 항암 유전자가 대식세포에서 잘 발현되도록 DNA 서열 ‘EF1a’를 찾아 적용시켰다. 그 결과 대식세포의 손상없이 유전자 전달 후 최대 20일 동안 안정적으로 항암 기능을 갖춘 ‘CAR 대식세포’ 생산이 유지됐다.
CAR 대식세포는 효과적으로 특정 암세포를 없애는 모습을 보여줬다. 급성 림프구성 백혈병과 B 세포 림프종의 대표적 세포주인 Nalm6와 Raji 암세포를 대상으로 붉은색 형광 단백질을 발현시킨 후 전자 현미경으로 5일 뒤 확인했다.
붉은색 부분이 눈에 띄게 줄어 들었다. CAR 대식세포가 대부분의 암세포를 삼켜 파괴한 것이다. 연구팀은 후속 연구를 통해 CAR 대식세포의 대량생산과 고효율 치료 적용 기술을 개발할 계획이다.
화학연 관련 연구팀은 “말초 혈액으로부터 얻은 대식세포의 낮은 항암 유전자 발현 문제를 렌티바이러스를 이용해 개선한 최초 사례라는 점에서 의미가 있다”고 설명했다.
이영국 화학연 원장은 “기존 CAR T 세포 치료법을 보완해 면역항암 치료 다각화에 이바지할 것”이라고 말했다.
이번 연구는 실험실 수준에서 입증한 것으로 상용화돼 환자에게 치료제로 사용되기 위해서는 대량 증식 기술 등이 개발돼야 한다. 연구실 규모의 연구개발 초기 단계로 2030년 이후 실용화가 가능할 것으로 화학연 관련 연구팀은 예상했다.
이번 논문(논문명: Lentivirus-based production of human chimeric antigen receptor macrophages from peripheral blood)은 2025년 1월 국제 학술지 ‘생체 신호 연구(Biomarker Research)’에 실렸다. 화학연 박지훈 박사가 교신저자로 최지우 석사후연구원이 1저자로 참여했다.
/정종오 기자(ikokid@inews24.com)
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